دوره 24، شماره 5 - ( 9-1390 )                   جلد 24 شماره 5 صفحات 640-647 | برگشت به فهرست نسخه ها


XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Cloning and secretive expression of Bacillus thermocatenulatus BTL2 lipase in Pichia pastoris Using natural and yeast α factor signal sequences. 3. 2011; 24 (5) :640-647
URL: http://ibs.org.ir/article-1-32-fa.html
کلونینگ و بیان ترشحی ژن لیپاز (BTL2) باسیلوس ترموکاتنولاتوس در پیکیا پاستوریس با استفاده از توالیهای نشانه طبیعی و آلفا فاکتور مخمری. 1. 1390; 24 (5) :640-647

URL: http://ibs.org.ir/article-1-32-fa.html


چکیده:   (752 مشاهده)
لیپاز (Triacylglycerol acylhydrolase EC 3.1.1.3 )، هیدرولیز تری آسیل گلیسرول به گلیسرول و اسیدهای چرب را در حد فاصل لایه چربی و آب کاتالیز می کند. لیپازها در فرمولاسیون شوینده ها، تهیه بیوسورفکتانتها، صنایع روغن، غذایی، کشاورزی، چوب و کاغذ، پزشکی و دارویی کاربرد دارند. مهم ترین کاربرد این آنزیم در صنایع شوینده است. در این تحقیق، پس از استخراج DNA ژنومی باکتری باسیلوس ترموکاتنولاتوس ) Bacillus thermocatenulatus ( مولد لیپاز، ژن لیپاز btl2 (همراه با توالی نشانه و بدون توالی نشانه) با روش PCR تکثیر و در حامل بیانی pPIC9 تحت کنترل پروموتر الکل اکسیداز کلون شد pYV128) و (pYV129 پس از تأیید صحت کلونینگ توسط PCR و برش آنزیمی، پلاسمیدهای نوترکیب فوق با آنزیم Bgl II خطی شده و با روش الکتروپوریشن به میزبان پیکیا پاستوریس (Pichia pastories) انتقال داده شدند. مخمر پیکیا پاستوریس نوترکیب در محیط BMGY کشت داده شد و با متانول بیان آنزیم لیپاز القاء شد. وجود آنزیم در محیط کشت با آزمون پارانیتروفنیل پالمیتات (pNPP) و روش ایمونوبلات تأیید شد. خالص سازی لیپاز نوترکیب به روش تعویض یونی انجام و فعالیت ویژه آنزیم به روش pH- stat تعیین شد. نتایج تولید U/L 18000 لیپاز نوترکیب در کشت فلاسک و کسب U/L12000 آنزیم نوترکیب خالص (راندمان خالص سازی 66 درصد) با فعالیت ویژه /mgμ 5728 را نشان داد.
متن کامل [PDF 366 kb]   (468 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي |
دریافت: ۱۳۹۵/۱۰/۵

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
کد امنیتی را در کادر بنویسید

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به انجمن زیست شناسی ایران می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2015 All Rights Reserved | Iranian Biology Society

Designed & Developed by : Yektaweb