دوره 24، شماره 3 - ( 6-1390 )
جلد 24 شماره 3 صفحات 342-354 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Agrobacterium–mediated transformation of Minou (Citrus sp.) and Darabi (Citrus grandis) and regeneration of transgenic explants expressing β–glucoronidase (uid A) gene.. 3. 2011; 24 (3) :342-354
URL: http://ibs.org.ir/article-1-3-fa.html
URL: http://ibs.org.ir/article-1-3-fa.html
تراریختی مینو و دارابی با واسطه آگروباکتریوم و باززایی ریزنمونه‌های بیان‌کننده ژن بتاگلوکورونیداز. 1. 1390; 24 (3) :342-354
چکیده: (1814 مشاهده)
تراریختی دو ژنوتیپ بومی مرکبات شامل مینو (Minou, Citrus sp.) و دارابی (Citrus grandis) با واسطه آگروباکتریوم تومه فاشینس، در شرایط مناسبی که برای بسیاری از گونه‌های مرکبات معرفی شده است، انجام شد. تأثیر دو تیمار مختلف شامل مدت زمان هم‌کشتی (24، 72 و 120 ساعت) و غلظتهای متفاوت هورمون بنزیل آمینوپورین (2، 3 و 4 میلی‌گرم در لیتر)، که تأثیر زیادی بر روی میزان تراریختی و باززایی دارند، در یک مجموعه 50 تایی از جداکشتها بررسی گردید. ناحیه میان گره شاخه نهالهای 8–6 ماهه رشد یافته در گلخانه، به طول حدود 1 سانتیمتر بریده شده و به عنوان ریزنمونه برای تراریختی مورد استفاده قرار گرفت. جداکشتها به همراه سویه C58C1 (GV3850) آگروباکتریوم تومه فاشینس واجد پلاسمید pBI121 ، واجد ژن بتا گلوکورونیداز (uid A)، در محیط هم‌کشتی قرار گرفتند. هفتاد و دو ساعت هم‌کشتی در محیط غنی از هورمون BAP (5 میلی‌گرم در لیتر) باعث افزایش تعداد سلولهای مستعد برای تراریختی در دو انتهای بریده شده و در نتیجه افزایش میزان تراریختی و باززایی گردید. بیان ژن بتا گالاکتورونیداز در ریزنمونه‌های تراریخت احتمالی با روش بیوشیمیایی و حضور آن با روش PCR بررسی شد. با به کارگیری شرایط بهینه، 8/34 درصد از ریزنمونه‌های مینو و 1/30 درصد از ریزنمونه‌های دارابی تراریخت شده، ژن گزارشگر β–گلوکورونیداز را بیان نمودند. پس از انتقال به محیط نوساقه، ریزنمونه‌های تراریخت رشد کرده و شاخه‌های 10–5 سانتیمتری قابل پیوند شدن ایجاد کردند. این اولین گزارش از تراریختی و باززایی ارقام بومی مرکبات ایران می‌باشد.
نوع مطالعه: پژوهشي |
دریافت: ۱۳۹۵/۱۰/۵
دریافت: ۱۳۹۵/۱۰/۵